Question

【生物﹣選修1生物技術實踐】

某研究小組設計了以下實驗探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）．實驗步驟如圖所示，培養(yǎng)基成分如表所示．請分析回答問題：

KH2PO4 1.4g

Na2HPO4 2.1g

MgSO4?7H2O 0.2g

葡萄糖 10.0g

尿素 1.0g

瓊脂 15.0g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選 目的菌 ，這種培養(yǎng)基屬于 選擇 培養(yǎng)基．

（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的 尿素 和 葡萄糖 ，實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是 為目的菌提供氧氣 ．

（3）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用 涂布平板（劃線） 的方法接種，獲得 單菌落 后繼續(xù)篩選．

（4）下列材料或用具中：①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實驗操作者的雙手．需要滅菌的是 ①② ；需要消毒的是 ③ ．（填序號）

（5）在進行分離分解尿素的細菌的實驗時，A同學從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落．A同學的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有 ①②③ （填序號）．

①由于土樣不同 ②由于培養(yǎng)基污染 ③由于操作失誤 ④沒有設置對照

（6）在該實驗中，可以通過檢測培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解，所依據(jù)的原理是 微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高 ．所用方法是在培養(yǎng)基中加入 酚紅指示劑 ，若尿素被分解，則培養(yǎng)基變成紅色．

 

 

Answer 1

（1）目的菌 選擇

（2）尿素 葡萄糖 為目的菌提供氧氣

（3）涂布平板（劃線） 單菌落

（4）①②③

（5）①②③

（6）微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高 酚紅指示劑

【解析】

試題分析：本題是對用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的配方及營養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、常用的接種方法、無菌操作技術、對分解尿素的菌的鑒定等相關知識的綜合性考查，回憶微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的配方和營養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作、常用的接種方法的具體操作和目的，無菌操作技術、對分解尿素的菌的鑒然后結(jié)合問題進行解答．

【解析】
（1）該實驗的目的是篩選到能高效降解尿素的細菌，因此培養(yǎng)基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的細菌（目的菌），不能分解尿素的細菌將因缺少氮源無法生長繁殖，因此從功能上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．

（2）目的菌生長繁殖需要的氮源來自尿素，碳源來自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需要微生物，因此需要震蕩培養(yǎng)．

（3）固體培養(yǎng)基上常用的接種方法是稀釋涂布法和平板劃線法；通過稀釋涂布法或者平板劃線法逐漸稀釋，當稀釋度足夠大時可以獲得由單個細胞繁殖而來的菌落，然后進行挑選．

（4）為了保證培養(yǎng)物不被污染，對培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管要進行滅菌，實驗操作者的雙手要進行消毒．

（5）由題意知，該同學與其他同學獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染；或者是實驗過程中沒有進行無菌操作．

（6）尿素被分解尿素的菌氧化成氨氣，氨氣會使培養(yǎng)基堿性增強，PH升高，指示劑酚紅變紅，因此以通過在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，檢測培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解．