Question

16．加利福尼亞大學(xué)的一組科學(xué)家通過基因工程技術(shù)成功地將螢火蟲的熒光素酶基因?qū)�入到大腸桿菌體內(nèi)．
（1）在基因工程中，獲得目的基因通常有兩種途徑，在此基因工程中，獲得目的基因最可能的途徑是人工合成法，在此過程中需要使用DNA聚合酶和逆（反）轉(zhuǎn)錄酶．
（2）將目的基因?qū)�入大腸桿菌需要運(yùn)載體的幫助．作為運(yùn)載體需具備的條件有ABD．
A．能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存
B．具有特定的限制酶切點(diǎn)
C．具有與目的基因相同的堿基片斷
D．具有某些標(biāo)記基因
（3）培育能發(fā)熒光的植物是生物工程學(xué)家的美好愿望之一．如果利用基因工程技術(shù)將熒光素酶基因成功導(dǎo)入植物細(xì)胞，并能夠表達(dá)，請(qǐng)問如何才能培育成能發(fā)熒光的植物幼苗？利用組織培養(yǎng)技術(shù)簡(jiǎn)述培育過程．先通過脫分化，得到愈傷組織，再通過再分化誘導(dǎo)生根生芽，得到植物苗．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
1、目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲得真核生物的目的基因最好采用人工合成法，即以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成DNA，該過程需要DNA聚合酶和逆轉(zhuǎn)錄酶．
（2）作為基因工程的運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)； ②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來．故選：ABD．
（3）將轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其過程為：先通過脫分化，得到愈傷組織，再通過再分化誘導(dǎo)生根生芽，得到植物苗．
故答案為：
（1）人工合成法      DNA聚合酶     逆（反）轉(zhuǎn)錄
（2）ABD
（3）利用組織培養(yǎng)技術(shù)      先通過脫分化，得到愈傷組織，再通過再分化誘導(dǎo)生根生芽，得到植物苗

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理，掌握基因工程的工具及作用以及基因工程的具體操作步驟，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)轉(zhuǎn)答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．