Question

安徽懷遠(yuǎn)盛產(chǎn)石榴，石榴酒是當(dāng)?shù)氐奶禺a(chǎn)酒，寧夏永寧盛產(chǎn)葡萄，葡萄酒是當(dāng)?shù)氐奶禺a(chǎn)酒，湖南洞庭乃魚(yú)米之鄉(xiāng)，家庭擅長(zhǎng)米酒釀制．

（1）以上三地家庭釀制當(dāng)?shù)靥禺a(chǎn)酒時(shí)，不必向料中接種酵母菌的是

 

地區(qū)．為什么？

 

．某家庭用50斤容量的瓷壇初次釀制30斤葡萄酒，幾天后瓷壇塑料封口外鼓，酒香四溢，非常成功．來(lái)年信心大增，照去年原樣釀制50斤，結(jié)果二十幾天過(guò)去了，仍無(wú)什么酒味，塑料封口也不外鼓，原因應(yīng)是

 

．
（2）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，科研人員將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種，過(guò)程如圖甲所示．
A．圖甲中，為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以

 

作為唯一的碳源．②③過(guò)程需要重復(fù)多次，目的是經(jīng)篩選純化獲得

 

．
B．某同學(xué)嘗試過(guò)程③的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示．該同學(xué)的接種方法是

 

；推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是

 

．
C．若要對(duì)培養(yǎng)液中的酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，下表是取0.1ml菌液進(jìn)行涂布時(shí)，不同稀釋倍數(shù)下統(tǒng)計(jì)的平板培養(yǎng)基上的菌落數(shù)：

稀釋倍數(shù)		103	104	105
重復(fù) 實(shí)驗(yàn)	1	1498	125	12
	2	1208	135	9
	3	1189	130	6

根據(jù)表中數(shù)據(jù)估算培養(yǎng)液中的酵母菌的濃度約為

 

個(gè)/mL．

Answer 1

考點(diǎn)：酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋,微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：分析圖甲：圖甲是將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種的過(guò)程．圖中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；②、③過(guò)程重復(fù)幾次的目的是純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌．
分析圖乙：圖乙是一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布，可見(jiàn)其采用的是稀釋涂布平板法，但圖中群落分布相對(duì)較集中．

解答： 解：（1）以上三地家庭釀制當(dāng)?shù)靥禺a(chǎn)酒時(shí)，不必向料中接種酵母菌的是寧夏永寧地區(qū)，原因是葡萄皮表面有野生酵母菌．初次釀制時(shí)瓷壇塑料封口外鼓，而再次釀制時(shí)塑料封口不外鼓，說(shuō)明菌種初期發(fā)酵氧氣不足，酵母菌不能大量繁殖，因此不能發(fā)酵產(chǎn)生大量酒精．
（2）A、普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，而工程酵母菌可以高效利用淀粉，所以用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基可以選出工程酵母菌．②、③過(guò)程重復(fù)幾次的目的是純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌．
B、由圖乙可知，該同學(xué)采用的是稀釋涂布平板法，但菌落比較集中，沒(méi)有很好的分散開(kāi)來(lái)，可能是涂布不均勻?qū)е碌模?br />C、根據(jù)表中數(shù)據(jù)可知，稀釋倍數(shù)為10³和10⁵時(shí)，各組數(shù)據(jù)之間的誤差較大，而稀釋倍數(shù)為10⁴時(shí)，各組數(shù)據(jù)比較接近，因此可以根據(jù)稀釋倍數(shù)為10⁴時(shí)的數(shù)據(jù)估算培養(yǎng)液中酵母菌的濃度，即

126+128+133

3

×104×10=1.29×10⁷個(gè)/ml．
故答案為：
（1）寧夏永寧   葡萄皮表面有野生酵母菌    菌種初期發(fā)酵氧氣不足，酵母菌不能大量繁殖
（2）A、淀粉     分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌   
B、稀釋涂布平板法     涂布不均勻     
C、1.30×10⁷

點(diǎn)評(píng)：本題以工程菌為素材，結(jié)合圖表綜合考查基因工程、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、果酒制作、培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的變化，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟；識(shí)記微生物的接種方法，能根據(jù)圖乙判斷接種方法及圖乙現(xiàn)象出現(xiàn)的原因；能分析表格，明確稀釋倍數(shù)為10³和10⁵時(shí)，各組數(shù)據(jù)之間的誤差較大，可通過(guò)稀釋倍數(shù)為10⁴時(shí)的數(shù)據(jù)估算培養(yǎng)液中酵母菌的濃度．