Question

如圖所示為平板劃線法分離純化細(xì)菌示意圖．根據(jù)所學(xué)知識(shí)，完成下列問題．

（1）微生物所需的營(yíng)養(yǎng)成分包括

 

、

 

、水和無機(jī)鹽．
（2）培養(yǎng)微生物時(shí)，除了考慮微生物生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)外，還要考慮微生物生長(zhǎng)所需的溫度、

 

以及是否需要O₂等．
（3）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，多采取

 

法，而對(duì)接種環(huán)或涂布器滅菌時(shí)則用

 

法．
（4）平板劃線時(shí)，為保證每次劃線都從上次劃線末端的微生物濃度開始，所以每次劃線前都要

 

，平板劃線結(jié)束后，最后一次劃的線不能與第一次劃的線

 

．
（5）脲酶可以將尿素分解為NH₃，從而使尿素溶液PH升高，這可用

 

試劑來檢測(cè)．用纖維素作唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，得到的纖維素分解菌中可能還混雜有

 

生物．
（6）抗生素可以抑制肽聚糖合成，從而可以抑制多數(shù)原核生物繁殖．實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有酵母菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌三種微生物混雜生長(zhǎng)的固體培養(yǎng)基，已知大腸桿菌菌落遇伊紅美藍(lán)試劑變?yōu)樽仙�，并帶有金屬光澤；金黃色葡萄球菌耐高濃度食鹽水，菌落為金黃色；酵母菌細(xì)胞壁成分主要為幾丁質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)條件好，氧氣充足時(shí)，顯微鏡下可見典型的出芽生殖．現(xiàn)在請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)合理的實(shí)驗(yàn)方案，從一個(gè)培養(yǎng)基中，將三種微生物依次分離開來．（所需試劑可自選）
實(shí)驗(yàn)方案：

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用

專題：

分析：1、培養(yǎng)基的基本成分：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長(zhǎng)因子．
2、微生物實(shí)驗(yàn)室分離中配制培養(yǎng)基的操作步驟：計(jì)算→稱量→溶解→調(diào)pH→滅菌步驟．
3、無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌；
4、微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，前者是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，后者是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．

解答： 解：（1）培養(yǎng)基的基本成分包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長(zhǎng)因子．
（2）培養(yǎng)微生物時(shí)，除了考慮微生物生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)外，還要考慮微生物生長(zhǎng)所需的溫度、pH以及是否需要O₂等．
（3）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，多采取高壓蒸汽滅菌法，而對(duì)接種環(huán)或涂布器滅菌時(shí)則用灼燒滅菌．
（4）平板劃線時(shí)，為保證每次劃線都從上次劃線末端的微生物濃度開始，所以每次劃線前都要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌，平板劃線結(jié)束后，最后一次劃的線不能與第一次劃的線相交．
（5）脲酶可以將尿素分解為NH₃，從而使尿素溶液PH升高，這可用酚酞試劑來檢測(cè)．用纖維素作唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，得到的纖維素分解菌中可能還混雜有自養(yǎng)微生物．
（6）要從一個(gè)培養(yǎng)基中，將三種微生物依次分離開來，就必須根據(jù)各自不同的特點(diǎn)來區(qū)分，比如根據(jù)菌落顏色，首先分離出金黃色葡萄球菌，然后向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)，將變?yōu)樽仙�，帶有金屬光澤的菌落分離出來，得到大腸桿菌，然后加入非磺胺類抗生素如青霉素，將培養(yǎng)基中的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌殺死，得到酵母菌．
故答案為：
（1）碳源  氮源
（2）PH
（3）高壓蒸汽滅菌   灼燒滅菌
（4）對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌       相交（相接、相連、交叉等）
（5）酚酞     自養(yǎng)微生物（硝化細(xì)菌）
（6）根據(jù)菌落顏色，首先分離出金黃色葡萄球菌，然后向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)，將變?yōu)樽仙�，帶有金屬光澤的菌落分離出來，得到大腸桿菌，然后加入非磺胺類抗生素如青霉素，將培養(yǎng)基中的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌殺死，得到酵母菌

點(diǎn)評(píng)：本題考查微生物培養(yǎng)和利用的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解生物實(shí)驗(yàn)的目的、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能．