Question

18．將目的基因?qū)�入動物受精卵�?nèi)可得到轉(zhuǎn)基因動物．回答問題：
（1）將目的基因?qū)�入動物受精卵�?nèi)需要構(gòu)建基因表達載體，基因表達載體除了含有目的基因外，還必須有啟動子、終止子和標記因子等．常用顯微注射將目的基因與表達載體導(dǎo)入動物的受精卵中．為檢測目的基因是否表達成功，可采用抗原一抗體雜交方法，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已表達成功．
（2）在體外培養(yǎng)受精卵時，為了維持無菌環(huán)境，影響培養(yǎng)液中添加抗生素．受精卵發(fā)育到囊胚時期開始分化，該時期的內(nèi)細胞團屬于胚胎干細胞．該細胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細胞核大，核仁明顯；在功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）將早期胚胎移植到代孕雌性體內(nèi)時，為使代孕個體與供體雌性生殖器官的生理變化相同，此前需要對代孕個體做同期發(fā)情處理．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、胚胎干細胞具有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞．另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造．

解答 解：（1）基因表達載體的組成包括：目的基因、啟動子、終止子和標記因子等．將目的基因?qū)�入受體細胞常用顯微注射法．為檢測目的基因是否表達成功，可采用抗原一抗體雜交方法，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已表達成功．
（2）在體外培養(yǎng)受精卵時，為了維持無菌環(huán)境，影響培養(yǎng)液中添加抗生素．囊胚的內(nèi)細胞團屬于胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細胞核大，核仁明顯，在功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）將早期胚胎移植到代孕雌性體內(nèi)時，為使代孕個體與供體雌性生殖器官的生理變化相同，此前需要對代孕個體做同期發(fā)情處理．
故答案為：
（1）啟動子、終止子和標記因子      顯微注射      抗原一抗體雜交
（2）無菌環(huán)境       內(nèi)細胞團       體積小、細胞核大，核仁明顯       發(fā)育的全能性
（3）同期發(fā)情

點評 本題考查基因工程、胚胎工程等知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題．