多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠使細(xì)胞壁破損.番茄果實(shí)成熟中,PG合成顯著增加,能使果實(shí)變紅變軟,但不利于保鮮.利用基因工程的方法減少PG基因的表達(dá),可延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期.科學(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上,導(dǎo)入到番茄細(xì)胞中,得到轉(zhuǎn)基因番茄.請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1)提取目的基因
①若已獲取PG的mRNA,可通
 
獲取PG基因.
②在該基因上游加結(jié)構(gòu)A可確;虻霓D(zhuǎn)錄,結(jié)構(gòu)A上應(yīng)具有
 
結(jié)合位點(diǎn).得到的目的基因兩側(cè)需人工合成BamHI黏性末端.已知BamHI的識(shí)別序列如上圖甲所示,請(qǐng)?jiān)趫D乙相應(yīng)位置上,畫出目的基因兩側(cè)的黏性末端.
③重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中的目的是
 

(2)用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后,可用含有
 
的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,與此同時(shí),為能更好地達(dá)到培養(yǎng)目的,還需在培養(yǎng)基中加入
 
.培養(yǎng)24~48h后取樣,在質(zhì)量濃度為0.3g/mL的蔗糖溶液中,觀察細(xì)胞
 
現(xiàn)象來鑒別細(xì)胞壁是否再生.
(3)由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄反義RNA,且能與
 
互補(bǔ)結(jié)合,抑制PG基因的正常表達(dá).判斷轉(zhuǎn)基因番茄培育成功的方法是
 

(4)在該番茄新品種的培育過程中,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法叫做
 
.獲得的轉(zhuǎn)基因番茄產(chǎn)生的種子不一定保留目的基因,科研人員常采用
 
方法使子代保持轉(zhuǎn)基因的優(yōu)良性狀.
(5)改造過程需要的工具酶有
 
,
 
,如果在此過程中形成的是平末端,則其“縫合”作用的酶是
 

(6)如圖為在恒溫、密閉的透明玻璃箱中模擬大棚栽種該番茄新品種的相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),其中甲圖為一天中光照強(qiáng)度變化的曲線,乙圖為CO2濃度為300μL?L-1時(shí)光照強(qiáng)度對(duì)光合作用影響的曲線.據(jù)圖回答下列問題:
①14點(diǎn)與10點(diǎn)相比,葉綠體合成有機(jī)物速率較快的是
 
點(diǎn),原因是
 

②若通過緩沖液維持密閉容器中CO2濃度恒定為300μL?L-1,9點(diǎn)C5的合成速率
 
(填“小于”、“等于”或“大于”)10點(diǎn)C5的合成速率,
 
點(diǎn)開始積累有機(jī)物,12~14點(diǎn)限制光合作用速率的主要因素是
 

③若向密閉容器中加入18O標(biāo)記的O2,請(qǐng)問在番茄的淀粉中能否檢測(cè)到放射性的存在?
 
.若能,請(qǐng)寫出18O的物質(zhì)大致轉(zhuǎn)移途徑;若不能,請(qǐng)說明理由.
 
考點(diǎn):基因工程的原理及技術(shù),影響光合作用速率的環(huán)境因素,遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯
專題:
分析:1、分析流程圖:圖示表示轉(zhuǎn)基因番茄的培育過程,在PG基因上游加結(jié)構(gòu)A以確;虻姆聪蜣D(zhuǎn)錄,再構(gòu)建基因表達(dá)載體,通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,將目的基因?qū)敕言|(zhì)體,培養(yǎng)使之再生出細(xì)胞壁,再用植物組織培養(yǎng)技術(shù)使子代保持轉(zhuǎn)基因的優(yōu)良性狀.
2、環(huán)境因素對(duì)光合作用速率的影響,如CO2濃度、溫度、光照強(qiáng)度.當(dāng)光照強(qiáng)度達(dá)到光補(bǔ)償點(diǎn)時(shí),光合作用的速率等于呼吸作用的速率;當(dāng)光照強(qiáng)度達(dá)到光飽和點(diǎn)時(shí),光合作用強(qiáng)度達(dá)到最大值,光照強(qiáng)度再增大已不能引起光合作用強(qiáng)度的增大.溫度影響酶的活性,影響光合速率.二氧化碳的濃度影響光合作用的暗反應(yīng).
解答: 解:(1)①已獲取PG的mRNA,可通過逆轉(zhuǎn)錄或cDNA文庫(kù)的方法獲得目的基因.
   ②因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是mRNA,在轉(zhuǎn)錄時(shí)需要RNA聚合酶.目的基因兩側(cè)的黏性末端如圖:

   ③重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中的目的是大量復(fù)制目的基因(克隆目的基因).
(2)由圖可知質(zhì)粒上含有卡那霉素抗性基因,所以含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后將會(huì)使原生質(zhì)體獲得抗卡那霉素的能力,因此可用含卡那霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選;與此同時(shí),為能更好地達(dá)到培養(yǎng)目的,還需在培養(yǎng)基中加入植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素).培養(yǎng)24~48h后取樣,在質(zhì)量濃度為0.3g/mL的蔗糖溶液中,觀察細(xì)胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象來鑒別細(xì)胞壁是否再生.
(3)反義RNA一般是指與編碼鏈或有義鏈互補(bǔ)的DNA鏈編碼的RNA,mRNA是由編碼鏈或有義鏈編碼的RNA,所以反義RNA和mRNA分子能互補(bǔ)成雙鏈的RNA.由于核糖體不能翻譯雙鏈的RNA,所以反義RNA與mRNA特異性的互補(bǔ)結(jié)合,即抑制了該mRNA的翻譯;若轉(zhuǎn)基因番茄的保質(zhì)期比非轉(zhuǎn)基因番茄長(zhǎng),則可確定轉(zhuǎn)基因番茄成功.
(4)在該番茄新品種的培育過程中,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法叫做農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法.獲得的轉(zhuǎn)基因番茄產(chǎn)生的種子不一定保留目的基因,科研人員常采用植物組織培養(yǎng)方法使子代保持轉(zhuǎn)基因的優(yōu)良性狀.
(5)改造過程需要的工具酶有限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶,如果在此過程中形成的是平末端,則其“縫合”作用的酶是T4DNA連接酶.
(6)①14點(diǎn)與10點(diǎn)時(shí)光照強(qiáng)度是相等的,但是植物是栽種在恒溫、密閉的透明玻璃箱中,密閉容器中14點(diǎn)CO2濃度因光合作用消耗降低,而10點(diǎn)時(shí)密閉容器的CO2濃度較高,故葉綠體合成有機(jī)物速率較快的是10點(diǎn).
②若通過緩沖液維持密閉容器中C02濃度恒定為300?L.L-1,9點(diǎn)時(shí)的光照強(qiáng)度低于10點(diǎn)時(shí)的光照強(qiáng)度,光反應(yīng)生成[H]和ATP的量較少,則三碳化合物的還原強(qiáng)度較弱,故9點(diǎn)C5的合成速率小于10點(diǎn)C5的合成速率.由圖3可知當(dāng)光照強(qiáng)度為100W/m2時(shí),光合作用的強(qiáng)度等于呼吸作用的強(qiáng)度,當(dāng)光照強(qiáng)度高于100W/m2時(shí),光合作用的強(qiáng)度大于呼吸作用的強(qiáng)度,即凈光合作用大于0,開始積累有機(jī)物.由圖2可知在8點(diǎn)時(shí)光照強(qiáng)度為100W/m2.由圖2可知,12點(diǎn)到14點(diǎn)時(shí),光照強(qiáng)度大于400W/m2,此時(shí)光照強(qiáng)度不影響光合作用的速率.但整個(gè)過程都是在恒溫的條件下進(jìn)行的,溫度也不是影響光合作用速率的因素,則說明影響因素只有CO2濃度.
③若向密閉容器中加入18O標(biāo)記的O2,被18O標(biāo)記的氧氣參與有氧呼吸的第三階段生成被18O標(biāo)記的水,被18O標(biāo)記的水參與有氧呼吸的第二階段生成被18O標(biāo)記的二氧化碳,被18O標(biāo)記的二氧化碳參與光合作用的暗反應(yīng)生成被18O標(biāo)記的糖類等有機(jī)物.則在馬鈴薯塊莖的淀粉中能檢測(cè)到放射性的存在.
18O的物質(zhì)大致轉(zhuǎn)移途徑為:
故答案為:
(1)①逆轉(zhuǎn)錄(或cDNA文庫(kù))      
    ②RNA聚合酶

   ③大量復(fù)制目的基因(克隆目的基因)
(2)卡那霉素            植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)      是否發(fā)生質(zhì)壁分離 
(3)天然PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA        轉(zhuǎn)基因番茄的保質(zhì)期與非轉(zhuǎn)基因番茄的保質(zhì)期進(jìn)行比較,保質(zhì)期延長(zhǎng)
(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法         植物組織培養(yǎng)
(5)限制性內(nèi)切酶           DNA連接酶        T4DNA連接酶
(6)①10          密閉容器中14點(diǎn)CO2濃度因光合作用消耗降低
    ②小于                  8              CO2濃度
    ③能       
點(diǎn)評(píng):本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因番茄的培育過程,考查基因工程的原理及技術(shù)、植物組織培養(yǎng)過程、植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離,要求考生識(shí)記基因工程的原理、工具及相關(guān)操作,能分析轉(zhuǎn)基因番茄培育過程圖,并從中提取有效信息答題;識(shí)記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用;掌握植物細(xì)胞質(zhì)壁分離的條件.影響綠色植物光合作用的因素光合作用的因素有多方面的,其外界因素因素有光照強(qiáng)度、CO2含量、溫度等,需要結(jié)合曲線圖理解掌握.
練習(xí)冊(cè)系列答案
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藍(lán)藻與酵母菌在結(jié)構(gòu)上的重要區(qū)別是前者( 。
A、無核膜B、無細(xì)胞壁
C、無細(xì)胞膜D、無DNA

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下列有關(guān)生命系統(tǒng)結(jié)構(gòu)層次的說法,正確的是(  )
A、所有生物都具有細(xì)胞層次
B、單細(xì)胞生物的細(xì)胞層次就是個(gè)體層次
C、生態(tài)系統(tǒng)是地球上最大的生命系統(tǒng)
D、群落層次的容量小于種群和生態(tài)系統(tǒng)

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下列關(guān)于基因工程的敘述,正確的是(  )
A、形成重組DNA分子過程在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行
B、具有某些標(biāo)記基因,便于對(duì)其進(jìn)行切割
C、DNA連接酶能夠連接被限制性核酸內(nèi)切酶斷開的化學(xué)鍵
D、重組DNA分子上的抗性基因可用于目的基因的檢測(cè)與表達(dá)

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限制性內(nèi)切酶是一種核酸切割酶,可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列.如圖依次為四種限制酶BamHI,EcoRI,HindIⅡ以及BglⅡ的辨識(shí)序列,箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位,其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合?( 。
A、BamHⅠ和EcoRⅠ
B、BamHⅠ和HindIⅡ
C、EcoRⅠ和HindIⅡ
D、BamHⅠ和BglⅡ

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獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是( 。
A、接種純種細(xì)菌
B、防止外來雜菌的入侵
C、適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)
D、將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌

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紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白,可用于治療腎衰性貧血等疾病由于天然EP0來源極為有限,目前臨床使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO)期間要生產(chǎn)流程如圖
(1)圖中①所指的是
 
技術(shù).
(2)圖中②所指的物質(zhì)是
 
,③所指的物質(zhì)是
 

(3)構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí),用不同類型的限制酶切割DNA后,可能產(chǎn)生粘性末端,也可能產(chǎn)生
 
末端.若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接,則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生
 
(相同,不同)粘性末端的限制酶.
(4)構(gòu)建的表達(dá)載體含有人EP0基因及其啟動(dòng)子、
 
、
 
等,其中啟動(dòng)子是
 
酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn).
(5)為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交,該雜交技術(shù)稱為
 

(6)將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體導(dǎo)入中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系常采用
 
法.如果要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞,先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的
 
中,然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞,通過DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的
 
上.
(7)檢測(cè) rhEPO的活性需用抗rhEPO單克隆抗體.分泌單克隆抗體的
 
細(xì)胞,可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是
 
并可大量制備.

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科目:高中生物 來源: 題型:

基因工程的主要技術(shù)環(huán)節(jié)依次是( 。
①篩選已獲得目的基因的受體細(xì)胞    ②制備重組DNA分子     ③使目的基因表達(dá)
④獲得目的基因                  ⑤重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞.
A、①②③④⑤
B、④⑤②③①
C、④②⑤①③
D、③②④⑤①

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科目:高中生物 來源: 題型:

現(xiàn)有兩個(gè)小麥品種,一個(gè)純種小麥性狀是高桿(D),抗銹病(T);另一個(gè)純種小麥的性狀是矮桿(d),易染銹。╰).兩對(duì)基因獨(dú)立遺傳.育種專家提出了如圖所示的Ⅰ、Ⅱ兩種育種方法以獲得小麥新品種.問:

(1)要縮短育種年限,應(yīng)選擇的方法是
 
(I或Ⅱ),依據(jù)的原理是
 
;
(2)圖中①和④基因組成分別為
 
 和
 

(3)(二)過程中,D和d的分離發(fā)生在
 
;(三)過程采用的方法稱 為
 
;(四)過程最常用的化學(xué)藥劑是
 

(4)(五)過程產(chǎn)生的抗倒伏抗銹病植株中的純合體占
 

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