Question

請回答下列有關(guān)問題：
（1）基因工程是一種

 

操作技術(shù)，需要借助限制酶、連接酶和載體才能進行．
（2）培育轉(zhuǎn)基因生物的操作是：先通過各種方法獲得目的基因，然后將目的基因與

 

所需要的多種原件組裝起來構(gòu)成一個

 

，再將其導入受體細胞，并使

 

．
（3）為獲得純度相對較高的DNA，某同學以雞血為材料展開了實驗探究，實驗步驟如下：
a．取雞血細胞懸液10mL，加蒸餾水20mL，同時用玻棒快速攪拌，過濾，取濾液，轉(zhuǎn)移到塑料材質(zhì)的大燒杯中
b．沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液，用玻棒沿一個方向輕輕攪拌，同時不斷收集析出的物質(zhì)．
c．根據(jù)雞血中幾種物質(zhì)的析出情況繪制的曲線（如圖）：
①如果只要收集纖維蛋白，可采取的措施是

 

．
②當硫酸銨溶液的飽和度最低約為

 

時，DNA的溶解度最小，與此同時析出的物質(zhì)還有

 

．
③如果要進一步去掉其他雜質(zhì)，盡可能提高獲得的DNA純度，可采取的辦法是

 

．（答出一點即可）

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),DNA的粗提取和鑒定

專題：

分析：基因工程又叫DNA重組技術(shù)，是指按照人們的意愿，進行嚴格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品．
基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�。虎诨�因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定．
DNA的粗提取與鑒定的實驗原理：
（1）DNA在氯化鈉溶液中的溶解度，是隨著氧化鈉的濃度的變化而改變的．當氯化鈉的物質(zhì)濃度為2 mol/L時，DNA的溶解度最大，濃度為 0.14mol/L時，DNA的溶解度最低．利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出． 
（2）DNA不溶于95%的酒精溶液，但是細胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液．利用這一原理，可以進一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA． 
（3）DNA中含有脫氧核糖，能與二苯胺（沸水浴）反應(yīng)生成藍色物質(zhì)，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑．
3、凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)不同大小的蛋白質(zhì)分子在凝膠柱中的不同移動速率而實現(xiàn)分離的．

解答： 解：（1）基因工程的操作對象是基因或DNA分子．（2）基因工程的一般步驟是：獲取目的基因、構(gòu)建基因表達載體、把目的基因?qū)�入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定，因此可以填上相應(yīng)內(nèi)容．
（3）①從實驗結(jié)果可以看出，當硫酸銨濃度為30%時，開始析出球蛋白，因此需要控制硫酸銨濃度為30%之前收集纖維蛋白．
②從實驗結(jié)果中可以看出，當硫酸銨濃度約為65%時，DNA全部析出，因此大約為65%時，DNA的溶解度最小，同時析出的物質(zhì)還有纖維蛋白、球蛋白和少量的tRNA．
③提純DNA，實際上就是把DNA與蛋白質(zhì)分開，可以采用如下方法：DNA不溶于酒精，但細胞中的其他物質(zhì)可溶于酒精的特點，進一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA；也可以用蛋白酶處理，使蛋白質(zhì)水解；將溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液放在60～75℃的恒溫水浴箱中保溫一段時間，蛋白質(zhì)變性析出，DNA不變性．
故答案為：
（1）DNA
（2）基因表達   表達載體    目的基因整合到受體細胞的DNA上
（3）①在硫酸銨濃度達到30%之前收集析出物
②65%    球蛋白、纖維蛋白（tRNA）
③將DNA與球蛋白的混合物加入到冷卻酒精中，收集再次析出物；用嫩肉粉（木瓜蛋白酶）處理溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液；將溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液放在60～75℃的恒溫水浴箱中保溫一段時間（答出一點即可）

點評：本題考查基因工程、DNA的粗提取和鑒定實驗的有關(guān)知識，意在考查考生識記能力和理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；理解實驗目的、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用．