Question

14．欲從土壤中篩選出能產(chǎn)生脲酶的微生物并予以純化計(jì)數(shù)，采用了如圖所示的基本操作流程，請回答下列問題：

（1）取得土樣后應(yīng)先用無菌水（填試劑）對土壤進(jìn)行梯度稀釋，然后將稀釋涂布在平面培養(yǎng)基上，這種選擇培養(yǎng)基在營養(yǎng)組成上的重要特點(diǎn)是．在這樣的培養(yǎng)基上長出的細(xì)菌不一定（填“一定”或“不一定”）都能產(chǎn)生脲酶．若在平板中加入酚紅，目的菌落出現(xiàn)的變化是菌落周圍出現(xiàn)紅圈．
（2）若要對相應(yīng)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，一個(gè)稀釋度應(yīng)涂布2到3個(gè)平板，并計(jì)算．若稀釋不夠高，所得的數(shù)據(jù)與實(shí)際值比較應(yīng)平均值偏小（填“偏大”“偏小”或“相等”）．經(jīng)涂布獲得的菌落可以采用平板劃線法進(jìn)一步純化，每次劃線后接種環(huán)必須，才能再次用于劃線．獲得的純化菌種可以保存在試管中，塞上棉塞或蓋上封口膜，不能密封，原因是有氧呼吸需要?dú)怏w流通．

Answer 1

分析 微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）進(jìn)行稀釋涂布平板法時(shí)，取得土樣后應(yīng)先用無菌水對土壤進(jìn)行梯度稀釋，然后將稀釋涂布在平面培養(yǎng)基上．根據(jù)題意可知，著重微生物能夠產(chǎn)生尿酶，因此這種選擇培養(yǎng)基在營養(yǎng)組成上的重要特點(diǎn)是氮源只有尿素．在這樣的培養(yǎng)基上長出的細(xì)菌不一定都能產(chǎn)生脲酶．若在平板中加入酚紅，目的菌落出現(xiàn)的變化是菌落周圍出現(xiàn)紅圈．
（2）若要對相應(yīng)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，一個(gè)稀釋度應(yīng)涂布2到3個(gè)平板，并計(jì)算．若稀釋不夠高，多個(gè)細(xì)菌聚集在一起只能長成一個(gè)菌落，導(dǎo)致所得的數(shù)據(jù)與實(shí)際值比較應(yīng)平均值偏小．經(jīng)涂布獲得的菌落可以采用平板劃線法進(jìn)一步純化，每次劃線后接種環(huán)必須灼燒滅菌，才能再次用于劃線．獲得的純化菌種可以保存在試管中，塞上棉塞或蓋上封口膜，不能密封，原因是細(xì)菌有氧呼吸需要?dú)怏w流通．
故答案為：
（1）無菌水氮源只有尿素不一定      菌落周圍出現(xiàn)紅圈
（2）平均值偏小灼燒細(xì)菌有氧呼吸需要?dú)怏w流通

點(diǎn)評 本題結(jié)合實(shí)驗(yàn)流程，考查微生物的培養(yǎng)和分離等有關(guān)知識，要求考生識記微生物培養(yǎng)和分離的知識，能根據(jù)題干信息“產(chǎn)生脲酶”答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．