Question

9．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如圖所示．請分析回答問題：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	1g	15g
將上述物質(zhì)溶解后，用自來水定容到1000mL

（1）此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？不能，理由是缺少植物激素（或缺少植物需要的各種營養(yǎng)）．
（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選目的菌，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的尿素和葡萄糖，實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是為目的菌提供氧氣．
（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用稀釋涂布平板法（平板劃線法）（方法）接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．
（5）下列材料或用具中：①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實驗操作者的雙手．
需要滅菌的是①②；需要消毒的是③．（填序號）
（6）在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落．A同學(xué)的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有①②③（填序號）．
①由于土樣不同 　 ②由于培養(yǎng)基污染　  ③由于操作失誤 　 ④沒有設(shè)置對照
（7）在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH增高，使指示劑變紅色．

Answer 1

分析 在植物組織培養(yǎng)過程中，決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是：植物激素的種類和比例．
選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長．
滅菌的定義，用物理或化學(xué)方法殺滅傳播媒介上所有的微生物，使其達到無菌．         
消毒的定義，用物理或化學(xué)方法殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物，使其達到無害化．

解答 解：（1）該培養(yǎng)基的成分中沒有植物激素，因此不能用于植物組織培養(yǎng)．
（2）該實驗的目的是篩選到能高效降解尿素的細菌，因此培養(yǎng)基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的細菌（目的菌）．不能分解尿素的細菌將因缺少氮源無法生長繁殖，因此從功能上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）目的菌生長繁殖需要的氮源來自尿素，碳源來自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需氧微生物，因此需要震蕩培養(yǎng)．
（4）圖中將細菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時，常采用涂布平板（劃線）的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．
（5）在實驗中，①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和②玻棒、試管、錐形瓶和吸管需要滅菌，③實驗操作者的雙手需要消毒．
（6）該同學(xué)與其他同學(xué)獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染；或者是實驗過程中沒有進行無菌操作．
（7）在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH增高，使指示劑變紅色．
故答案為：
（1）不能 　        缺少植物激素（或缺少植物需要的各種營養(yǎng)）
（2）篩選目的菌 　     選擇
（3）尿素 　     葡萄糖            為目的菌提供氧氣
（4）稀釋涂布平板法（平板劃線法）                
（5）①②③
（6）①②③
（7）酚紅指示劑　       脲酶

點評 本題考查了微生物培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識，考生要明確選擇培養(yǎng)基的選擇作用；識記培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分，識記植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基的成分；識記常用的接種方法和具體操作過程；特別注意滅菌和消毒的對象和區(qū)別．