4、科學家運用基因工程技術將人胰島素基因與大腸桿菌的

質粒DNA分子重組，并且在大腸桿菌體內獲得成功表

達。圖示a處為胰島素基因與大腸桿菌質粒DNA結合

的位置，它們彼此能結合的依據是          （    ）

       A．基因自由組合定律                            

       B．半保留復制原則

       C．基因分離定律       

       D．堿基互補配對原則

二、填空題

（每空？ 分，共？ 分）

3、2008年諾貝爾化學獎授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個融合基因，再將該融合基因轉入真核生物細胞內，表達出的蛋白質就會帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是                                                                                        （    ）

A．追蹤目的基因在細胞內的復制過程

B．追蹤目的基因插入到染色體上的位置

C．追蹤目的基因編碼的蛋白質在細胞內的分布

D．追蹤目的基因編碼的蛋白質的空間結構

2、錢永健先生因在研究綠色熒光蛋白方面的杰出成就而獲2008年諾貝爾獎。在某種生物中檢測不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉入該生物體內后，結果可以檢測到綠色熒光。由此可知           （    ）

    A．該生物的基因型是雜合的

    B．該生物與水母有很近的親緣關系

    C．綠色熒光蛋白基因在該生物體內得到了表達

    D．改變綠色熒光蛋白基因的1個核苷酸對，就不能檢測到綠色熒光

1、下列關于基因工程的敘述，錯誤的是                                                                      （    ）

A．目的基因和受體細胞均可來自動、植物或微生物

B．限制性核酸內切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶

C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性

D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達

38、番茄營養(yǎng)豐富，是人們喜愛的一類果蔬。但普通番茄細胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制細胞產生多聚半乳糖醛酸酶，該酶能破壞細胞壁，使番茄軟化，不耐貯藏。為滿足人們的生產生活需要，科學家們通過基因工程技術，培育出了抗軟化、保鮮時間長的番茄新品種。（操作流程如圖）請回答：

（1）過程①需要的工具酶有                               。

（2）在構建基因表達載體時，除了要在重組DNA中插入目的基因外，還需要有

                                                                  。

（3）提取目的基因采用的限制性核酸內切酶的識別序列和切點是—↓GATC—。在目的基因的兩側各有1個酶的切點，請畫出目的基因兩側被限制酶切割后形成的黏性未端的過程示意圖。

                                                                      。

（4）在番茄新品種的培育過程中，將目的基因導入受體細胞的方法叫做             。

（5）從圖中可見，mRNA1和mRNA2的結合直接導致了                 無法合成，最終使番茄獲得了抗軟化的性狀。

（6）培養(yǎng)②、③為植物組織培養(yǎng)過程中的                          。

（7）上述轉基因番茄會通過花粉將抗多聚半乳糖醛酸酶基因傳播給其它植物而造成基因污染，原因是                                      ，請你提出一個上述轉基因工程的改良方案，以防止這樣的污染發(fā)生。

37、天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經一系列復雜的轉化過程才能被利用。研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉人釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產生酒精。請回答下列問題：

   （1）將淀粉酶基因切割下來所用的工具是                  ，用                將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子            ，以完成工程菌的構建。

   （2）若要鑒定淀粉酶基因是否插人釀酒酵母菌，可采用的檢測方法是             ；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用                       檢測。將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液，工程菌周圍出現(xiàn)透明圈，請解釋該現(xiàn)象發(fā)生的原因。

（3）如何進一步鑒定不同的轉基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？

（4）微生物在基因工程領域中有哪些重要作用？

36、目前基因工程所用的質粒載體主要是以天然細菌質粒的各種元件為基礎重新組建的人工質粒，pBR322質粒是較早構建的質粒載體，其主要結構如圖一所示。

（1）構建人工質粒時要有抗性基因，以便于                     。

（2）pBR32Z分子中有單個EcoRI限制酶作用位點，EcoR 1只能識別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側各有1個EcoRI的切點，請畫出目的基因兩側被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端。                    。

（3）pBR322分子中另有單個的BamHI限制酶作用位點，現(xiàn)將經BamHI處理后的質粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連接酶作用恢復          鍵，成功的獲得了重組質粒。說明                                      。

（4）為了檢測上述重組質粒是否導入原本無amp^R和tet^R的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結果（空圈表示與圖二對照無菌落的位置）。與圖三空圈相對應的圖二中的菌落表現(xiàn)型是                 ，圖三結果顯示，多數(shù)大腸桿菌導入的是                  。

五、綜合題

（每空？ 分，共？ 分）

35、糖尿病是一種常見病，且發(fā)病率有逐年上升的趨勢。下圖是利用基因工程技術生產胰島素的操作過程示意圖，請據圖回答。

（1）過程②必需的酶是            酶。

（2）能否利用人的皮膚細胞來完成①的過程？       ，為什么？                                              

                                                                  。

（3）若A中共有a個堿基對，其中腺嘌呤有b個，則③④⑤過程連續(xù)進行5次，至少需要提供鳥嘌呤         個。

（4）在利用AB獲得C的過程中，必須用                切割A和B，再加入                 ，才可以形成C。

（5）在進行基因工程操作過程中，胰島素基因必需與運載體——質粒結合后才能進入大腸桿菌體內，并且在細菌內增殖。質粒的化學本質是一種                   。

（6）不同生物間基因的移植成功，說明生物共用一套                    。

34、下圖為利用生物技術獲得生物新品種的過程．據圖回答：

（1） 在基因工程中．A→B為____________技術。利用的原理是_______________，其中a為：_______________的過程，b過程使用的酶是___________________。

（2）B→C為轉基因綿羊的培育過程，c過程用到的生物技術主要有動物細胞培養(yǎng)和______________技術．在動物細胞培養(yǎng)過程中，需讓培養(yǎng)液中含有—定量的CO₂，其主要作用是_______________________。

（3）B→—D為抗蟲棉的培育過程，其中d過程常用的方法是__________________，要確定目的基因（抗蟲基因）導入受體細胞后是否能穩(wěn)定遺傳并表達，需進行檢測和鑒定工作。請寫出在個體水平上的鑒定或方法過程：__________________________。