10、（山東）（8分）（生物一生物技術(shù)實(shí)踐）

人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下：

請回答：

（1）配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行                     。

     接種前，要對人參根進(jìn)行              。

（2）用于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做                 。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于             污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于            

     污染。

（3）用少量           酶處理愈傷組織，獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。

（4）人參皂苷易溶于水溶性（親水性）有機(jī)溶劑，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用          

     方法，操作時(shí)應(yīng)采用                加熱。

9、利用微生物分解玉米淀粉生產(chǎn)糖漿，具有廣闊的應(yīng)用前景。但現(xiàn)有野生菌株對淀粉的轉(zhuǎn)化效率低，某同學(xué)嘗試對其進(jìn)行改造，以獲得高效菌株�！　�

（1）實(shí)驗(yàn)步驟：　　

①配置________（固體、半固體、液體）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為________�！　�

②將_____________接入已滅菌的培養(yǎng)基平板上。　　

③立即用適當(dāng)劑量的紫外線照射，其目的是___________________�！　�

④菌落形成后，加入碘液，觀察菌落周圍培養(yǎng)基的顏色變化和變化范圍的大小。周圍出現(xiàn)_______________現(xiàn)象的菌落即為初選菌落，經(jīng)分離、純化后即可達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹！　?/p>

（2）若已得到二株變異菌株I和II，其淀粉轉(zhuǎn)化率較高，經(jīng)測定菌株I淀粉酶的催化活性高，菌株II的淀粉酶蛋白含量高，經(jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，突變發(fā)生在淀粉酶基因的編碼區(qū)或非編碼區(qū)，可推測出菌株I的突變發(fā)生在_________區(qū)，菌株II的突變發(fā)生在____________區(qū)。

8、（寧夏）.【生物——選修1生物技術(shù)實(shí)踐】（15分）

   （1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、______、______等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。

   （2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和______；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能__________。

   （3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_______。

   （4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。

   （5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_________。

   （6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

7、（江蘇）(6分)酶解法制備原生質(zhì)體的原理是利用酶溶液對細(xì)胞壁成分的降解作用。蝸牛酶液從蝸牛(以植物為食)消化腺中提��；果膠酶、纖維素酶從微生物中提取。為了研究不同酶液的酶解效果，某實(shí)驗(yàn)小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表。請回答有關(guān)問題。

(注：“+”越多表示綠色越深，“一”表示顏色無顯著變化)

(1)實(shí)驗(yàn)過程中，需要輕搖試管，其目的是▲   ，使原生質(zhì)體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺。

(2)從綠色的深淺可推測：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有  ▲   等多種酶。該實(shí)驗(yàn)中▲  是空白對照組，其設(shè)置意義是▲  。

(3)用網(wǎng)篩過濾原生質(zhì)體到離心管內(nèi)，離心后收集沉淀物，并用  ▲ 洗滌。

(4)原生質(zhì)體是否符合要求還需進(jìn)行檢驗(yàn)，其檢驗(yàn)的方法是  ▲ 。

三、綜合題

（每空？ 分，共？ 分）

6、（江蘇多選）下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有

  A．提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)胞

  B．用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)

C．蛋白質(zhì)提取和分離過程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA

D．蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化

二、填空題

（每空？ 分，共？ 分）

5、（江蘇多選）加工橘子罐頭，采用酸堿處理脫去中果皮(橘絡(luò))，會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解法去除橘絡(luò)，可減少污染。下列生長在特定環(huán)境中的4類微生物，可以大量產(chǎn)生所用酶的有

  A．生長在麥麩上的黑曲霉    B．生長在酸奶中的乳酸菌

C．生長在棉籽殼上的平菇    D．生長在木屑上的木霉

4、（江蘇）下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是

  A．固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢明顯

B．固定化酶的應(yīng)用中，要控制好pH、溫度和溶解氧

C．利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥，需提供適宜的營養(yǎng)條件

  D．利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，糖類的作用只是作為反應(yīng)底物

3、（重慶）下列有關(guān)大腸桿菌的敘述，正確的是

  A大腸桿菌以復(fù)制方式進(jìn)行繁殖，其擬核是一個(gè)環(huán)狀DNA分子

  B在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上，大腸桿菌首先利用乳糖作碳源

  C用大腸桿菌工程菌生產(chǎn)干擾素時(shí)．應(yīng)及時(shí)添加核酸等生長因子

  D處于對數(shù)期的大腸桿菌．常作為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料

2、（安徽）下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是

A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白膝培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板

B.取10⁴、10⁵ 、10⁶倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1ml，分別涂布于各組平板上

C．將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37⁰C恒溫培養(yǎng)24-48小時(shí)

D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)