3.萌發(fā)的禾谷類種子中淀粉酶活性較強(qiáng),主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶.α-淀粉酶不耐酸、較耐熱,在pH為3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐熱,在70℃條件下15min后失活.
實(shí)驗(yàn)材料:萌發(fā)3天的小麥種子(芽長約1cm).
主要試劑及儀器:麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液、5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋等.
實(shí)驗(yàn)步驟:
步驟一:制作麥芽糖梯度液.取7支干凈的具塞刻度試管,編號,按表加入試劑,再將試管置于60℃水浴中加熱2min,取出后按試管號順序排列.
試劑試管號
1234567
麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液(mL)00.20.61.01.41.62.0
蒸餾水(mL)2.01.81.41.0XYZ
斐林試劑(mL)2.02.02.02.02.02.02.0
步驟二:利用萌發(fā)3天的小麥種子制備淀粉酶溶液.
步驟三:將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃水浴中15min,取出后迅速冷卻.
步驟四:另取四支試管,編號A、B、C、D,向A、B試管中各加5mL 5%淀粉溶液,向C、D試管中分別加入2mL已經(jīng)處理的酶溶液(忽略其中含有的少量麥芽糖)和蒸餾水,將四支試管置于40℃恒溫水浴中保溫10min,然后將C、D試管中的溶液分別加入到A、B試管中,搖勻后繼續(xù)在40℃恒溫水浴中保溫10min.
步驟五:取A、B試管中反應(yīng)溶液各2mL分別加入E、F試管,然后向E、F試管分別加入2mL斐林試劑,60℃水浴加熱2min,觀察顏色變化.
結(jié)果分析:將E試管中顏色與步驟一中獲得的麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比較,獲得該試管中麥芽糖濃度,并計(jì)算出α-淀粉酶催化效率.
請分析回答:
(1)本實(shí)驗(yàn)的目的是測定小麥種子中α淀粉酶催化效率.
(2)步驟一的5~7試管中加入蒸餾水的量(X、Y)分別是0.6和0.4 (單位mL).
(3)實(shí)驗(yàn)中B試管所起的具體作用是檢測實(shí)驗(yàn)使用的淀粉溶液中是否存在還原糖.
(4)請補(bǔ)全步驟五的做法:60℃水浴加熱2min.

分析 α-淀粉酶不耐酸、較耐熱,在pH為3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐熱,在70℃條件下15min后失活.實(shí)驗(yàn)步驟三:將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃水浴中15min,取出后迅速冷卻,這樣導(dǎo)致β-淀粉酶失活,因此該實(shí)驗(yàn)的目的是探究小麥種子中α淀粉酶的催化效率.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要遵循對照原則和單一變量原則.

解答 解:(1)將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃水浴中15 min,取出后迅速冷卻,β淀粉酶不耐熱,在70℃條件下15 min后失活,因此,本實(shí)驗(yàn)的目的是測定小麥種子中α淀粉酶的催化效率.
(2)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要遵循對照原則和單一變量原則,所以各個(gè)試管中液體的總量要相等,則步驟一的5~7試管中加入蒸餾水的量(X、Y、Z)分別是0.6mL、0.4mL、0mL.
(3)實(shí)驗(yàn)中B試管起對照作用,具體作用是檢測實(shí)驗(yàn)使用的淀粉溶液中是否存在還原糖.
(4)斐林試劑可在水浴加熱的條件下鑒定還原糖的存在,所以步驟五的做法中要補(bǔ)上在60℃水浴條件下加熱2min.
故答案為:
(1)小麥種子中α淀粉酶催化效率
(2)0.6        0.4
(3)檢測實(shí)驗(yàn)使用的淀粉溶液中是否存在還原糖
(4)60℃水浴加熱2 min

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖表,考查影響酶活性的探究實(shí)驗(yàn),要求考生掌握實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需要遵循的原則,即對照原則和單一變量原則,能結(jié)合題干信息“α-淀粉酶不耐酸、較耐熱,在pH為3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐熱,在70℃條件下15min后失活”和實(shí)驗(yàn)步驟三的具體操作,判斷該實(shí)驗(yàn)的目的,同時(shí)能根據(jù)實(shí)驗(yàn)的單一變量原則,判斷表中X、Y、Z的具體數(shù)值.

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  A1.53 4.5 
00.4440.6940.7780.776
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500.4830.7560.8500.853
依據(jù)上述實(shí)驗(yàn)回答下列問題:
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(2)本實(shí)驗(yàn)的自變量是不同濃度的K+、Mg2+.實(shí)驗(yàn)中的無關(guān)變量有溫度、PH值(寫兩個(gè)).
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(5)從表中數(shù)據(jù)可以得出在在一定的濃度范圍內(nèi)K+、Mg2+都能提高H+-ATP酶的活性,相同濃度條件下,條件下,H+-ATP酶活性最高,實(shí)驗(yàn)結(jié)論為K+、Mg2+兩者共同作用比K+或Mg2+單獨(dú)作用時(shí),H+-ATP酶的活性更高.

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