Question

8．一種廣泛使用的除草劑（含氮 有機(jī)物）在土壤中不易被降解，長(zhǎng)期使用可污 染土壤．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按圖1程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）．

（1）制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理．現(xiàn)有一升土壤浸出液，用無菌吸管吸取1mL樣液至盛有9mL無菌水的試管中，照此依次稀釋103稀釋度．各取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三個(gè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為 55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為5.6×10⁸． 
（2）要從長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從用途方面來看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是
在無氮培養(yǎng)基中添加該除草劑．
（3）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵．在劃線接種時(shí)，連續(xù)劃線的目的是 將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個(gè)菌落．
（4）在培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明圈菌落利用的氮源主要是氮?dú)猓畬?shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2顯示的A～E五種菌株中，E是最理想菌株．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，本題這種根據(jù)流程圖看，“無氮培養(yǎng)基+高濃度的除草劑”，說明A、B、C培養(yǎng)基中是以除草劑為唯一氮源．
2、每克樣品中的菌落數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下的平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL）M代表稀釋的倍數(shù)．

解答 解：（1）圖中稀釋的倍數(shù)是10⁸，三個(gè)菌落的平均數(shù)=（55+56+57）÷3=56，則每毫升樣品中菌株數(shù)=56÷0.1×10³=5.6×10⁵個(gè)，所以每升土壤浸出液中的菌株數(shù)=5.6×10⁵×10³=5.6×10⁸個(gè)．
（2）該除草劑為含氮有機(jī)物，為了選育能降解該除草劑的細(xì)菌，應(yīng)采用唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，即無氮的固體培養(yǎng)基中添加該除草劑．
（3）接種技術(shù)的核心是無菌操作，防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度．在劃線接種時(shí)，連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個(gè)菌落．
（4）由于該除草劑的培養(yǎng)基不透明，被菌落分解后可產(chǎn)生透明帶，無透明帶說明除草劑未被分解，菌落利用的氮源就只能是空氣中的氮?dú)饬�；E透明圈最大，故是最理想菌株．
故答案為：
（1）5.6×10⁸
（2）在無氮培養(yǎng)基中添加該除草劑 
（3）防止外來雜菌的入侵稀釋獲得單個(gè)菌落 
（4）氮?dú)釫

點(diǎn)評(píng) 本題的知識(shí)點(diǎn)是微生物培養(yǎng)，篩選微生物的方法、微生物的數(shù)目的測(cè)定等方法，主要考查學(xué)生運(yùn)用微生物的培養(yǎng)技術(shù)解決生活中問題的能力和對(duì)微生物，是實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)技術(shù)的綜合應(yīng)用能力．