Question

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機(jī)化合物）在土壤中不易降解，長(zhǎng)期使用可導(dǎo)致土壤污染．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）．

（1）在長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌是因?yàn)?div id="y0u6k64" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

，B步驟培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)配方特點(diǎn)是：

 

．從物理性質(zhì)、用途兩方面來看，該培養(yǎng)基屬于

 

．
（2）實(shí)驗(yàn)室最常用的滅菌方法是利用高溫處理達(dá)到滅菌的效果．高溫滅菌的原理是高溫使微生物的

 

等物質(zhì)發(fā)生

 

．

 

滅菌法是微生物研究和教學(xué)中應(yīng)用最廣、效果最好的濕熱滅菌法．
（3）在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？

 

（4）在劃線培養(yǎng)時(shí)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原因是

 

．
（5）土壤中生活著多種細(xì)菌，其中生物固氮菌能以空氣中的氮?dú)鉃榈�源，因此D步驟固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，有透明帶菌落利用氮源是

 

，無透明帶菌落是由

 

繁殖形成的，降解該除草劑的細(xì)菌應(yīng)挑選

 

（有、無）透明帶菌落．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．本題主要考查土壤中微生物的分離與，根據(jù)土壤中微生物的分離的實(shí)驗(yàn)操作過程、無菌操作的相關(guān)知識(shí)入手解答．

解答： 解：（1）由于長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中目的菌的數(shù)量多（密度大），所以應(yīng)該在長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌．據(jù)圖分析，B的操作是平板劃線，該培養(yǎng)基應(yīng)該為選擇培養(yǎng)基，即是以該除草劑為唯一氮源（在無氮培養(yǎng)基中添加該除草劑）．該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基．
（2）高溫滅菌的原理是高溫使微生物的蛋白質(zhì)和核酸發(fā)生變性．濕熱滅菌法最常用的是高壓蒸汽滅菌．
（3）在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線的原因是（劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少），每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落．
（4）選擇培養(yǎng)基中缺少大部分細(xì)菌可利用的氮源（多數(shù)細(xì)菌不能以該除草劑為氮源），所以在劃線培養(yǎng)時(shí)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)．
（5）能夠利用該除草劑的微生物能夠?qū)⑴囵B(yǎng)基中的除草劑中的含氮物質(zhì)分解利用而形成透明圈，故有透明帶菌落利用氮源是該除草劑，無透明帶的菌落是生物固氮菌繁殖形成的，分離培養(yǎng)時(shí)應(yīng)該挑選有透明帶菌落．
故答案為：
（1）長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中目的菌的數(shù)量多（密度大）   以該除草劑為唯一氮源（在無氮培養(yǎng)基中添加該除草劑）  固體選擇培養(yǎng)基
（2）蛋白質(zhì)和核酸   變性   高壓蒸汽
（3）（劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少），每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落
（4）培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源（多數(shù)細(xì)菌不能以該除草劑為氮源）
（5）該除草劑   生物固氮菌   有

點(diǎn)評(píng)：解答此類題目的關(guān)鍵是對(duì)土壤中微生物的分離這個(gè)實(shí)驗(yàn)的熟練掌握，和在微生物實(shí)驗(yàn)中的無菌操作相關(guān)知識(shí)的熟練應(yīng)用．