Question

19．在藥品生產(chǎn)中，人們逐步利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)出如干擾素，白細(xì)胞介素，凝血因子等各種高質(zhì)量低成本的藥品，請分析回答：
（1）DNA連接酶包括E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶兩種．
（2）在用目的基因與質(zhì)粒形成重組DNA過程中，一般要用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶，其中限制酶切割的是磷酸二酯鍵鍵，其特點是只能識別特定的DNA序列，并在兩個特定的脫氧核苷酸之間切割．
（3）將含有“某激素基因”的質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞后，能在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)直接合成“某激素”，則該激素在細(xì)菌體內(nèi)的合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個階段．
（4）基因工程形成工程菌的遺傳學(xué)原理是基因重組．
（5）基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技術(shù)是DNA分子雜交技術(shù)；其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用分子雜交技術(shù)；最檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是抗原-抗體雜交．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運載體：常用的運載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）DNA連接酶包括E．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶兩種，E•coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T₄DNA連接酶來源于T₄噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低．
（2）限制酶切割的是磷酸二酯鍵鍵，其特點是只能識別特定的DNA序列，并在兩個特定的脫氧核苷酸之間切割．
（3）將含有“某激素基因”的質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞后，能在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)直接合成“某激素”，說明該激素的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)的合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個階段．
（4）基因工程形成工程菌的遺傳學(xué)原理是基因重組．
（5）基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定，其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入了目的基因，采用技術(shù)是DNA分子雜交技術(shù)；其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用分子雜交技術(shù)；最檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是抗原-抗體雜交．
故答案為：
（1）E．coliDNA連接酶     T₄DNA連接酶   
（2）磷酸二酯鍵   只能識別特定的DNA序列
（3）轉(zhuǎn)錄   翻譯 
（4）基因重組 
（5）DNA分子雜交技術(shù)   采用分子雜交技術(shù)    抗原-抗體雜交

點評 本題考查基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理，掌握基因工程的具體操作步驟及各步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．