Question

已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能破氨基嘌呤阻斷．人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，促融獲得雜種細(xì)胞．請回答：
（1）試管中加入這兩種細(xì)胞后，還要加入誘導(dǎo)劑，除融合的雜種細(xì)胞外，還有

 

種融合細(xì)胞，細(xì)胞融合所依據(jù)的原理是

 

．
（2）設(shè)計一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，并說明原理：
方法：在培養(yǎng)液中加入

 

，培養(yǎng)后收集增殖細(xì)胞．
原理：培養(yǎng)液中加入該物質(zhì)后，下列細(xì)胞中，不能生長的細(xì)胞有

 

（寫序號），不能生長的原因是

 

，有的細(xì)胞能生長，原因是

 

．
①骨髓瘤細(xì)胞  ②融合的淋巴細(xì)胞  ③雜種細(xì)胞  ④融合的骨髓瘤細(xì)胞  ⑤淋巴細(xì)胞
（3）培養(yǎng)分離出的雜種細(xì)胞，培養(yǎng)液中除了有糖、氨基酸、水、無機(jī)鹽、微量元素、促生長因子外，還必須添加

 

，同時還應(yīng)控制好培養(yǎng)液的溫度、

 

（至少寫兩點）等外界環(huán)境條件．若出現(xiàn)細(xì)胞的接觸抑制時，應(yīng)用

 

處理后分瓶培養(yǎng)．
（4）將分離出的雜種細(xì)胞在不同條件下繼續(xù)培養(yǎng)，獲得A、B、C三細(xì)胞株．各細(xì)胞株內(nèi)含有的人染色體如表（“+”有，“-”無），測定各細(xì)胞株中人體所具有的五種酶的活性．結(jié)果是：①B株有a酶活性：②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均無e酶活性．若人基因的作用不受鼠基因的影響，則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的第

 

號染色體上．

細(xì)胞株	人染色體編號
	1	2	3	4	5	6	7	8
A株	+	+	+	+	-	-	-	-
B株	+	+	-	-	+	+	-	-
C株	+	-	+	-	+	-	+	-

Answer 1

考點：單克隆抗體的制備過程,動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程

專題：

分析：分析表格：B株具有a酶活性，所以支配a酶合成的基因位于5號染色體上；A、B、C株均有b酶活性，所以支配a酶合成的基因位于1號染色體上；A、B株具有c酶活性，所以支配c酶合成的基因位于2號染色體上；C株有d酶活性，所以支配d酶合成的基因位于7號染色體上；A、B、C株均無e酶活性，所以支配e酶合成的基因位于8號染色體上．

解答： 解：（1）人淋巴細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng)，只考慮細(xì)胞兩兩融合，有三種融合細(xì)胞，即淋巴細(xì)胞自身融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合形成的細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞．細(xì)胞融合所依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動性．
（2）在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，培養(yǎng)后收集增殖細(xì)胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D全合成途徑的骨髓細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，淋巴細(xì)胞一般不分裂增殖．因此培養(yǎng)液中加入該物質(zhì)后，不能生長的細(xì)胞有①骨髓瘤細(xì)胞、②融合的淋巴細(xì)胞、④融合的骨髓瘤細(xì)胞、⑤淋巴細(xì)胞．人淋巴細(xì)胞和骨髓癌細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖，因此③雜種細(xì)胞能生長．
（3）培養(yǎng)分離出的雜種細(xì)胞，培養(yǎng)液中除了有糖、氨基酸、水、無機(jī)鹽、微量元素、促生長因子外，還必須添加動物血清，同時還應(yīng)控制好培養(yǎng)液的溫度、PH、滲透壓、溶解氧等外界環(huán)境條件．若出現(xiàn)細(xì)胞的接觸抑制時，應(yīng)用胰蛋白酶處理形成單個細(xì)胞后分瓶培養(yǎng)．
（4）根據(jù)A、B、C株均有b酶活性，再據(jù)圖可知支配b酶合成的基因位于1號染色體上；根據(jù)A、B、C株均無e酶活性，再據(jù)圖可知支配e酶合成的基因位于8號染色體上；同理可推知，支配a酶合成的基因位于6號染色體上，支配c酶合成的基因位于2號染色體上，支配d酶合成的基因位于7號染色體上．
故答案為：
（1）2          細(xì)胞膜的流動性
（2）氨基嘌呤       ①②④⑤加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D全合成途徑的骨髓細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，淋巴細(xì)胞一般不分裂增殖
人淋巴細(xì)胞和骨髓癌細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖
（3）動物血清     PH、滲透壓、溶解氧       胰蛋白酶
（4）6、1、2、7、8

點評：本題考查單克隆抗體的制備過程，意在考查考生分析題文和表格提取有效信息和得出正確結(jié)論的能力；識記能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運用所學(xué)知識，解決生物學(xué)問題的能力．