Question

人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷．如圖甲是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答：

（1）制備單克隆抗體過(guò)程中要用到

 

、

 

技術(shù)．
（2）在細(xì)胞內(nèi)DNA合成一般有兩條途徑，主途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻斷此途徑．另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經(jīng)酶催化作用合成DNA，而骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成沒(méi)有此輔助途徑．
①利用DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的HAT培養(yǎng)基含有多種成分，其中添加的

 

成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用．
②最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是

 

．
（3）產(chǎn)前診斷是優(yōu)生的主要措施之一，檢查羊水和羊水中的胎兒脫落細(xì)胞，能反映胎兒的病理情況．圖1是羊水檢查的主要過(guò)程，圖2是某家族遺傳系譜圖，請(qǐng)據(jù)圖乙回答：
①圖1中，在羊水細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量

 

以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，同時(shí)還應(yīng)控制培養(yǎng)基的

 

、溫度、pH和溶解氧等外界環(huán)境條件．在出現(xiàn)細(xì)胞的接觸抑制時(shí)，應(yīng)

 

處理．
②圖1中，在染色體分析時(shí)，通常選用處于

 

時(shí)期細(xì)胞，主要觀察染色體的

 

．
③圖2中，已知甲�。ɑ�因用A、a表示）為一種常染色體遺傳�。�乙病（基因用B、b表示）的遺傳方式是

 

．
④若圖2中Ⅲ₂與Ⅲ₃近親結(jié)婚生了一個(gè)男孩，則該男孩患乙病的概率為

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過(guò)程,產(chǎn)前檢測(cè)

專(zhuān)題：

分析：1．制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過(guò)程有：正常小鼠免疫處理、動(dòng)物細(xì)胞的融合（物、化、生法）、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)、專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的提純．
2．單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體．
3．三次篩選：①篩選能夠產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞②篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）③篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．
4．雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．

解答： 解：（1）制備單克隆抗體的誘導(dǎo)過(guò)程有：正常小鼠免疫處理、動(dòng)物細(xì)胞的融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)、專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體的提純．要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)．
（2）①氨基喋呤可以阻斷在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成DNA．因此配制的HAT培養(yǎng)基中添加氨基喋呤的成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用．
    ②雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體．
（3）①在羊水細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，同時(shí)還應(yīng)控制培養(yǎng)基的溫度、滲透壓及PH和溶解氧等外界環(huán)境條件．在出現(xiàn)細(xì)胞的接觸抑制時(shí)，應(yīng)胰蛋白酶處理．
②因?yàn)橛薪z分裂中期，染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰，所以在進(jìn)行染色體分析時(shí)，通常選用處于有絲分裂中期的細(xì)胞，主要觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目．
③由II-5號(hào)和II-6號(hào)患乙病，III-3號(hào)和III-5號(hào)正常，故乙病為顯性遺傳病，II-5號(hào)患病，但是III-3號(hào)正常，故致病基因位于常染色體上，故乙病為常染色體顯性遺傳．
④只看乙病，III-2號(hào)的基因型是Bb，III-3號(hào)的基因型是bb，子代基因型有兩種情況：Bb和bb，患病的概率是

1

2

．
故答案為：
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)    動(dòng)物細(xì)胞融合
（2）①氨基喋呤    ②能無(wú)限增殖并分泌特異性抗體
（3）①血清  滲透壓  用胰蛋白酶
②有絲分裂中期       結(jié)構(gòu)數(shù)目
③常染色體顯性遺傳  
④

1

2

點(diǎn)評(píng)：本題考查了制備單克隆抗體及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，要求學(xué)生熟記具體流程、原理、篩選目的、單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用．