Question

12．請(qǐng)回答有關(guān)基因工程的相關(guān)問題
（1）基因工程的核心步驟基因表達(dá)載體構(gòu)建．
（2）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞中方法顯微注射法．
（3）目的基因是否在受體細(xì)胞中的表達(dá)，分子水平的檢測是抗原抗體雜交技術(shù)．
（4）標(biāo)記基因的作用是篩選含目的基因的受體細(xì)胞（供重組DNA選擇和鑒定）．
（5）農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒有T-DNA序列，能帶著目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體的DNA上．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲�。虎诨�因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測與表達(dá)．其中核心步驟是：基因表達(dá)載體構(gòu)建．
（2）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（3）檢測目的基因是否在受體細(xì)胞中的表達(dá)，常用抗原抗體雜交技術(shù)．
（4）標(biāo)記基因的作用是篩選含目的基因的受體細(xì)胞（供重組DNA選擇和鑒定）．
（5）農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒有T-DNA序列，能帶著目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體的DNA上．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體構(gòu)建
（2）顯微注射法
（3）抗原抗體雜交技術(shù)
（4）篩選含目的基因的受體細(xì)胞（供重組DNA選擇和鑒定）
（5）T-DNA

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．