Question

8．國(guó)家飲用水標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，每升飲用水中大腸桿菌不超過(guò)3個(gè)．某小組欲通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)自來(lái)水中大腸桿菌的含量，已知大腸桿菌在伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基培養(yǎng)，大腸桿菌菌落呈深紫色．請(qǐng)根據(jù)下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)步驟回答問(wèn)題：

（1）配制培養(yǎng)基：配制伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基時(shí)，除蛋白胨、乳糖、伊紅、美藍(lán)等原料外，還需要水、無(wú)機(jī)鹽和瓊脂．在這些成分中，能為大腸桿菌提供氮源的是蛋白胨．?dāng)嚢杓訜嶂镣耆�溶解后調(diào)節(jié)PH，分裝到錐形瓶．
（2）倒平板：配制好的培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌 法滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板．平板冷凝后應(yīng)將平板倒過(guò)來(lái)（倒置） 放置，以防止皿蓋上的水珠落人培養(yǎng)基．
（3）接種：在下圖的系列稀釋操作中（10¹、10²、10³表示稀釋倍數(shù)），依次將1mL液體移人下一個(gè)盛有9 mL蒸餾水的試管中．過(guò)程a所用的接種方法為（稀釋）涂布平板法．
（4）觀察與計(jì)數(shù)：通過(guò)一段時(shí)間的培養(yǎng)，觀察統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)皿表面深紫色菌落的數(shù)目，結(jié)果如圖所示，則自來(lái)水樣本中大腸桿菌超標(biāo)1000 萬(wàn)倍．
（5）用這種方法測(cè)定密度，實(shí)際活菌數(shù)量要比測(cè)得的數(shù)量可能多，原因是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上觀察的是一個(gè)菌落．

Answer 1

分析 培養(yǎng)基根據(jù)物理性質(zhì)可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基的基本營(yíng)養(yǎng)成分有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水等成分；滅菌和消毒的主要區(qū)別是：消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法反殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）；滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子．

解答 解：（1）該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，故要加入凝固劑瓊脂，培養(yǎng)基的基本營(yíng)養(yǎng)成分有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水等成分，能為大腸桿菌提供氮源的是蛋白胨，溶解后還要調(diào)節(jié)PH值，再分裝到錐形瓶中．
（2）配制好的培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法滅菌后，待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板．等待平板冷卻凝固（大約需5～10min）后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下，皿底在上，防止水蒸氣凝結(jié)的小水滴污染培養(yǎng)基．
（3）系列稀釋操作中，依次將1mL液體移人下一個(gè)盛有9mL蒸餾水的試管中，使?jié)舛日�好為原�?lái)的十分之一．
微生物接種方法主要有（稀釋）涂布（抹）平板法和平板劃線法，過(guò)程a所用的接種方法為（稀釋）涂布平板法．
（4）根據(jù)題圖估算自來(lái)水中大腸桿菌的菌落數(shù)是3÷0.1×10³×10³=3×10⁷個(gè)/L，超標(biāo)1000萬(wàn)倍．
（5）由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)平板上觀察的是一個(gè)菌落，因此估算的菌落數(shù)少于實(shí)際菌落數(shù)．
故答案為：
（1）瓊脂    蛋白胨     PH    
（2）高壓蒸汽滅菌    倒過(guò)來(lái)（倒置）
（3）9   （稀釋）涂布平板法     
（4）1000
（5）多     當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí)，平板上觀察的是一個(gè)菌落

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的培養(yǎng)和數(shù)量測(cè)定的相關(guān)內(nèi)容，意在考查學(xué)生的應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)探究能力，試題難度一般．