Question

9．利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥-花椰菜植株，已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，技術(shù)人員用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如下圖．

據(jù)圖回答下列問(wèn)題：
（1）該過(guò)程用到的工程技術(shù)有植物體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)．
（2）過(guò)程①所需的酶是纖維素酶和果膠酶，過(guò)程②PEG的作用是促進(jìn)原生質(zhì)體的融合，經(jīng)過(guò)②操作后，需篩選出融合的雜種細(xì)胞，顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的葉綠體存在可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志．
（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是保持原生質(zhì)體完整性．原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織．
（4）若分析再生植株的染色體變異類(lèi)型，應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖，制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目；將雜種植株栽培在含有黑腐病菌的環(huán)境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁的過(guò)程；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過(guò)程；之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)即可得到雜種植株．

解答 解：（1）圖中先去掉兩種植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，然后誘導(dǎo)融合獲得雜種細(xì)胞，再通過(guò)植物組織培養(yǎng)獲得雜種植株，該過(guò)程是植物體細(xì)胞雜交．
（2）指望細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專(zhuān)一性原理，可采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁；聚乙二醇（PEG）的作用是促進(jìn)原生質(zhì)體融合．
（3）去掉細(xì)胞壁后獲得的原生質(zhì)體需要放在適宜濃度的甘露醇溶液中，保持原生質(zhì)體完整性，避免失水或吸水；在植物組織培養(yǎng)中，經(jīng)過(guò)脫分化后形成愈傷組織．
（4）由于染色體在顯微鏡下能看見(jiàn)，因此可以制作臨時(shí)裝片，觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目，以確定是否發(fā)生染色體變異；對(duì)雜種植物進(jìn)行鑒定最簡(jiǎn)單的方法是從個(gè)體水平上進(jìn)行檢測(cè)，即接種黑腐病菌，觀察植物的性狀．
故答案為：
（1）植物體細(xì)胞雜交  植物組織培養(yǎng)
（2）纖維素酶和果膠酶    促進(jìn)原生質(zhì)體的融合 
（3）保持原生質(zhì)體完整性   愈傷組織  
（4）形態(tài)和數(shù)目  黑腐病菌

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合培育抗黑腐病雜種植株的流程圖，考查植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物體細(xì)胞雜交的概念、過(guò)程及意義，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．