(一)質(zhì)壁分離
原理:①細(xì)胞液濃度>細(xì)胞外溶液濃度時(shí),細(xì)胞吸水;細(xì)胞液濃度<細(xì)胞外溶液濃度時(shí),細(xì)胞失水
②細(xì)胞壁與原生質(zhì)層的伸縮能力不同。
1、條件:細(xì)胞內(nèi)外溶液濃度差,活細(xì)胞,大液泡
2、材料:紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞(具紫色大液泡),質(zhì)量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
3、步驟:制作洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片→觀察→蓋玻片一側(cè)滴蔗糖溶液,另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離)→蓋玻片一側(cè)滴清水, 另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(質(zhì)壁分離復(fù)原)
4、結(jié)論: 細(xì)胞外溶液濃度 > 細(xì)胞內(nèi)溶液濃度,細(xì)胞失水 質(zhì)壁分離
細(xì)胞外溶液濃度 < 細(xì)胞內(nèi)溶液濃度,細(xì)胞吸水 質(zhì)壁分離復(fù)原
2、步驟:
(1)探究溫度對(duì)酶活性的影響
溫度對(duì)酶活性的影響
步驟 |
項(xiàng)目 |
試管1 |
試管2 |
試管3 |
1 |
加入可溶性淀粉溶液 |
2mL |
2mL |
2mL |
2 |
放置在不同溫度環(huán)境下5分鐘 |
0℃ |
100℃ |
60℃ |
3 |
加入新配置的淀粉酶溶液 |
1mL |
1mL |
1mL |
4 |
滴入碘液 |
2滴 |
2滴 |
2滴 |
5 |
觀察結(jié)果 |
變藍(lán) |
變藍(lán) |
不變藍(lán) |
在溫度對(duì)酶活性的影響的實(shí)驗(yàn)中,三支試管的條件,除溫度外均相同。3號(hào)試管處在60℃的溫度條件下,酶活性最大,試管中的淀粉被分解,滴入碘液后不會(huì)變藍(lán)。2號(hào)試管的溫度條件是100℃, 這樣高溫度條件下,淀粉酶已失去活性,1號(hào)試管的溫度條件是O℃,低溫抑制淀粉酶的活性。所以2號(hào)和1號(hào)試管中的淀粉都沒(méi)有被分解,滴上碘液后都會(huì)變藍(lán),此實(shí)驗(yàn)可以證明;酶的催化作用需要適宜的溫度條件,溫度過(guò)高和過(guò)低都將影響酶的活性。
(2)探究pH對(duì)酶活性的影響
實(shí)驗(yàn)1 過(guò)氧化氫(H2O2)在過(guò)氧化氫酶的催化作用下,可以分解成水和氧氣,可以放入帶火星的木條,看能否復(fù)燃來(lái)檢測(cè)是否有氧氣產(chǎn)生。
步驟 |
項(xiàng)目 |
試管1 |
試管2 |
試管3 |
|
1 |
加入過(guò)氧化氫溶液 |
2mL |
2mL |
2mL |
|
2 |
加入蒸餾水 |
1mL |
- |
- |
|
3 |
加入鹽酸溶液 |
- |
1mL |
- |
|
4 |
加入NaOH溶液 |
- |
- |
1mL |
|
5 |
滴加肝臟研磨液 |
2滴 |
2滴 |
2滴 |
|
6 |
37℃水浴 |
5min |
5min |
5min |
|
7 |
檢 驗(yàn) |
放入帶火星的木條 |
復(fù)燃 |
不復(fù)燃 |
不復(fù)燃 |
試管內(nèi)氣泡產(chǎn)生量 |
有氣泡產(chǎn)生 |
沒(méi)有氣泡 產(chǎn)生 |
沒(méi)有氣泡 產(chǎn)生 |
2號(hào)試管內(nèi)加入了鹽酸,溶液的pH較低,3號(hào)試管內(nèi)加入了氫氧化鈉,溶液的pH較高,在過(guò)低或過(guò)高pH環(huán)境中,過(guò)氧化氫酶失去活性,不能使過(guò)氧化氫分解,沒(méi)有氧氣產(chǎn)生而1號(hào)試管沒(méi)有加入酸或堿,溶液近似中性,過(guò)氧化氫酶將過(guò)氧化氫分解成水和氧氣,使木條復(fù)燃。
實(shí)驗(yàn)2
原理:淀粉在淀粉酶的作用下,被分解成麥芽糖,麥芽糖能與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應(yīng),生成磚紅色沉淀
步驟 |
項(xiàng)目 |
試管1 |
試管2 |
試管3 |
1 |
加入可溶性淀粉溶液 |
2mL |
2mL |
2mL |
2 |
加入蒸餾水 |
1mL |
- |
- |
3 |
加入鹽酸溶液 |
- |
1mL |
- |
4 |
加入NaOH溶液 |
- |
- |
1mL |
5 |
加入新配置的淀粉酶溶液 |
2滴 |
2滴 |
2滴 |
6 |
60℃水浴 |
5min |
5min |
5min |
7 |
加入斐林試劑 |
2mL |
2mL |
2mL |
8 |
50℃-60℃水浴 |
2min |
2min |
2min |
9 |
觀察結(jié)果 |
有磚紅色沉淀 |
無(wú) |
無(wú) |
實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象記錄如下:1號(hào)試管有磚紅色沉淀生成,2號(hào)試管無(wú)磚紅色沉淀生成,3號(hào)試管無(wú)磚紅色沉淀生成。
2號(hào)試管內(nèi)加入了鹽酸,溶液的pH較低,3號(hào)試管內(nèi)加入了氫氧化鈉,溶液的pH較高,在這樣的pH環(huán)境中,淀粉酶失去活性,不能使淀粉分解,所以試管中加人斐林試劑后并無(wú)磚紅色沉淀生成。1號(hào)試管內(nèi)沒(méi)有加入酸或堿,溶液近似中性,這樣的pH適于淀粉酶發(fā)揮催化作用,所以淀粉被分解并與斐林試劑反應(yīng),生成磚紅色沉淀。以上實(shí)驗(yàn)可以證明,酶的催化作用需要適宜的pH,pH偏低或偏高都能影響酶的活性
原理:淀粉遇碘后,形成藍(lán)色的復(fù)合物。淀粉酶可以可以使淀粉水解成麥芽糖,麥芽糖遇碘后,不形成藍(lán)色的復(fù)合物。
1、材料:新配置的淀粉酶溶液,新鮮肝臟研磨液,可溶性淀粉溶液,過(guò)氧化氫溶液等。
2、原理:葉綠體在顯微鏡下觀察,綠色,球形或橢球形。
用健那綠染液染色后的口腔上皮細(xì)胞中線粒體成藍(lán)綠色,細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色。
步驟 |
操作方法 |
目的與作用 |
(1)取材 |
①新鮮的蘚類(lèi)的葉 ②菠菜葉下表皮略帶一些葉肉 |
①蘚類(lèi)葉為單層細(xì)胞 ②下表皮容易撕取,要略帶些葉肉 |
(2)制片 |
注意葉片不能太干了,保持有水的狀態(tài) |
以免影響細(xì)胞活性 |
(3)觀察 |
葉綠體呈橢圓形,可隨細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)而流動(dòng)。葉綠體在弱光下以最大面積(長(zhǎng)軸)轉(zhuǎn)向光源,在強(qiáng)光下以最小面積(短軸)轉(zhuǎn)向光源。 |
|
(1)取材 |
漱口,口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下 |
|
(2)染色 |
將口腔細(xì)胞放在健那綠液滴上 |
|
(3)觀察 |
蓋上蓋玻片,顯微鏡下觀察,線粒體被染成藍(lán)綠色 |
|
問(wèn)題 |
1、為什么不用植物細(xì)胞來(lái)觀察線粒體? 植物線粒體相對(duì)較少,葉綠體顏色易掩蓋線粒體被染成的藍(lán)綠色。 2、如果觀察發(fā)現(xiàn)染色不足,如何補(bǔ)色? 在蓋玻片一側(cè)滴加健那綠液,另一側(cè)用吸水紙吸 |
1、材料:新鮮蘚類(lèi)葉、黑藻葉或菠菜葉,口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片
1、顯微鏡的使用:取鏡→安放→對(duì)光→壓片→觀察→收放。
(1)低倍鏡使用:(觀察任何標(biāo)本都必須先用低倍鏡,且標(biāo)本應(yīng)透明)
(2)高倍鏡使用:
先使用低倍鏡確定目標(biāo)→移動(dòng)裝片,使目標(biāo)位于視野中央→轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,換用高倍鏡→
調(diào)焦(轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋)(視野較暗,可調(diào)反光鏡或光圈)
3、蛋白質(zhì)的檢測(cè)
(1)試劑:雙縮脲試劑(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步驟:試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻→觀察顏色變化(紫色)
2、脂肪的檢測(cè)
(1)材料的選取:含脂肪量越高的組織越好,如花生的子葉。
(2)步驟:制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央
↓
染色(滴蘇丹Ⅲ染液2-3滴切片上→2-3min后吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作裝片(滴1-2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片)
↓
鏡檢鑒定(顯微鏡對(duì)光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)
實(shí)驗(yàn)原理:可溶性糖中的還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖),與斐林試劑發(fā)生作用,可以生成磚紅色的沉淀。脂肪可以被蘇丹III染成橘黃色。蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,可以產(chǎn)生紫色反應(yīng)。
1、還原糖的檢測(cè)
還原性糖:有還原性基團(tuán)--游離醛基或酮基的糖;如葡萄糖、果糖、麥芽糖、
(1)材料的選。哼原糖含量高,白色或近于白色,如蘋(píng)果,梨,白蘿卜。
(2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),現(xiàn)配現(xiàn)用。
(3)步驟:取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(淺藍(lán)色→棕色→磚紅色)
實(shí)驗(yàn)原理:DNA遇甲基綠呈綠色,RNA可被吡羅紅染成紅色
實(shí)驗(yàn)步驟
步驟 |
器材與試劑 |
作用與原理 |
(1)制片 |
①將牙簽刮下的口腔上皮細(xì)胞置于載玻片上0.9%的NaCl溶液滴 ②載玻片烘干 |
1 0.9%的NaCl溶液防止細(xì)胞破裂,2 維持細(xì)胞形態(tài)。 3 烘干使細(xì)胞固定在載玻片上 |
(2)水解 |
8%HCl中30℃保溫5分鐘 |
鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞,同時(shí)使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離。 |
(3)沖洗 |
用蒸餾水緩流沖洗10分鐘 |
|
(4)染色 |
2滴吡羅紅甲基綠染色5分鐘 |
甲基綠使DNA染上綠色 吡羅紅使RNA染上紅色 |
(5)觀察 |
顯微鏡下觀察 |
|
實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色.
分布:真核生物的DNA主要分布在細(xì)胞核中,線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA;RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。
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